ABSTRACT
The study of antiradical activity of Phlomoides alpina (Pall.) Adylov, Kamelin & Makhm. extracts and anatomy structure of plant material was done.
Ключевые слова: антирадикальная активность; DPPH; анатомическое строение; экстракт; Phlomoides alpina (Pall.) Adylov; Kamelin & Makhm.
Keywords: antiradical activity; DPPH; anatomical structure; extract; Phlomoides alpina (Pall.) Adylov; Kamelin & Makhm.
Материалом для настоящего исследования является многолетнее растение Phlomoides alpina (Pall.) Adylov, Kamelin & Makhm. (зопник альпийский) семейства Lamiaceae Lindl. Принадлежность к этому семейству объясняет ярко выраженный аромат, который определяется присутствием на всех или на некоторых частях растения желёзок, выделяющих эфирные масла сложного состава (в них входят ароматические спирты, фенолы, терпены, альдегиды и другие органические соединения). Именно присутствием этих масел в значительной степени определяется практическое использование губоцветных в качестве технических, лекарственных и ароматических растений. Это растение не образует зарослей, встречается рассеянно небольшими группами из нескольких особей. Местом распространения является среднегорные и высокогорные луга Республики Алтай, Средней и Восточной Азии [5].
Исходное сырье собрано в высокогорье хребта Ивановский. Сроки заготовок — конец июля — первая декада августа 2012 г.
Объектом же исследования являются сухие экстракты листьев и цветков, в качестве экстрагентов были использованы гексан, этилацетат и бутанол.
Целью работы явилось изучение антирадикальной активности гексанового, этилацетатного и бутанольного экстрактов растения Ph. alpina и исследование анатомического строения растения.
Экстракция. Мелкоизмельченную надземную часть (листья, цветочные корзинки) Ph. аlpina экстрагировали со смесью хлороформа и спирта. Экстракция проводилась 3-х-кратно, соотношение сырье-экстрагент 1:10. Хлороформно-спиртовое извлечение объединяли и упаривали на роторном испарителе. Полученную сумму экстрактивных веществ далее подвергали экстракцией гексаном, этилацетатом и бутанолом.
Методика исследования антирадикальной активности. Для определения ингибирования 2,2-дифенил-1-пикрилгидразилрадикала к 0,1 мл исследуемого образца в диапазоне концентраций 0,1; 0,25; 0,5; 0,75; 1 мг/мл добавляли 3 мл 6×10‾5 М раствора радикала. Центрифужные пробирки находились в штативе, завернутого в черный полиэтилен. После интенсивного перемешивания растворы оставлялись в темноте и через 30 минут производили измерение оптической плотности при длине волны 520 нм. Значения величины антирадикальной активности (АРА) исследуемых объектов определяли по формуле:
АРА (%)=А0-Аt /А0×100,
где: А0 — оптическая плотность контрольной пробы;
Аt — оптическая плотность рабочего раствора [6].
Измерение оптической плотности исследуемых экстрактов производили при 520 нм на приборе Cary 60. Антирадикальную активность исследуемых экстрактов сравнивали с антирадикальной активностью бутилгидроксианизола (BHA). Значения исследуемых экстрактов антирадикального эффекта, рассчитанные по формуле, приведены в таблице 1.
Таблица 1.
Антирадикальная активность (%) экстрактов при разных концентрациях
На основании полученных данных (табл. 1) и графика (рис. 1) видно, что все исследованные экстракты Ph. alpina имеют невысокую антирадикальную активность по сравнению с ВНА.
Рисунок 1. Динамика антирадикальной активности при изменении концентрации образцов
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
Нами установлено, что среди трех экстрактов Ph. alpina низкой антирадикальной активностью обладает гексановый экстракт (PhA-1), средней антирадикальной активностью — этилацетатный экстракт (PhA-2), а бутанольный экстракт (PhA-3) в концентрациях 0,1 и 0,25 мг/мл имеет минимальную оптическую плотность, но затем при концентрациях 0,5; 0,75 и 1,0 мг/мл значительно увеличивается.
Таким образом, на основании полученных данных установлено, что все исследованные экстракты Phlomoides alpina имеют не высокую антирадикальную активность по сравнению с ВНА.
Анатомическое исследование Phlomoides alpina.
Материалы и методы. Объектом исследования являлись надземные части (листья и стебли) Ph. alpina, собранного в фазе плодоношения.
При исследовании Ph. alpina сухие образцы сырья размачивали в горячей воде и размягчали в смеси глицерин-спирт-вода дистиллированная в соотношении 1:1:1 [2, 4], кипятили в 5 %-ном водном растворе гидроксида калия. Изготавливали поверхностные препараты и срезы вручную. Рисунки выполняли при помощи аппарата РА-4М. При описании анатомического строения использовали принципы, изложенные в трудах В.Н. Вехова, Л.И. Лотовой [1, 3].
Анатомия. Клетки нижнего эпидермиса извилисто-стенные, верхнего эпидермиса — прозенхимные, прямостенные (рис. 2). Устьица аномоцитного типа (окружены 4 и более клетками эпидермы) и встречаются на обеих сторонах листа, но преобладают на нижней. Листья опушены простыми многоклеточными трихомами, крупными, стенки их утолщены, некоторые трихомы имеют коленный изгиб. Эфирно-масличные железки округлой формы, крупные, темно-окрашенные, приподнимаются над поверхностью эпидермиса.
Рисунок 2. Препарат листа Ph . alpina с поверхности. Ув. 15х10: А — нижний эпидермис, Б — верхний эпидермис, 1 — основные клетки эпидермы, 2 — эфирно-масличные железки, 3 — устьица, 4 — простые многоклеточные трихомы
Чашелистники крупные, сросшиеся в трубку с зубчатыми отгибами. Эпидермис внешнего края состоит из округлых или протяженных клеток с извилистыми стенками. Поверхность не густо опушена длинными многоклеточными простыми трихомами (рис. 3).
Рисунок 3. Эпидермис чашелистника Ph . alpina с поверхности. Ув. 15х10: 1 — основные клетки эпидермиса, 2 — трихомы
Стебель на поперечном срезе 4-гранный (рис. 4), полый внутри. Периферическая часть покрыта 1-слойным эпидермисом, под ним в углах находятся участки уголковой колленхимы, между углами 2—3 слоя ассимиляционной ткани хлоренхимы. Центральный цилиндр отделен от коровой зоны слоем эндодермы, клетки которого тангентально утолщенные. Проводящая система пучкового типа. Пучки многочисленные, мелкие, образуют кольцевую зону; коллатерального типа (флоэма снаружи, ксилема внутри), закрытые (камбий отсутствует).
Рисунок 4 . Схема поперечного среза стебля Ph. alpina. Ув. 15х10: 1 — эпидермис, 2 — колленхима, 3 — хлоренхима, 4 — флоэма, 5 — ксилема, 6 — эндодерма, 7 — внутренняя полость
Таким образом, диагностическими признаками сырья Phlomoides alpina (Pall.) Adylov, Kamelin & Makhm. являются форма клеток эпидермиса листа и стебля, округлые эфирно-масличные железки, форма и строение кроющих трихом.
Список литературы:
1.Вехов В.Н., Лотова Л.И., Филин В.Р. Практикум по анатомии и морфологии высших растений. М.: МГУ, 1980. — 560 с.
2.Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии. М.: Медицина, 1977. — 255 с.
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
3.Лотова Л.И. Ботаника: Морфология и анатомия высших растений. М.: КомКнига, 2007. — 512 с.
4.Прозина М.Н. Ботаническая микротехника. М.: Высшая школа, 1960. — 206 с.
5.Тахтаджяна А.Л. Жизнь растений. М.: Просвещение, 1974. — 47 с.
6.Sawant O., Kadam V.J., Ghosh R. In vitro Free Radical Scavenging and Antioxidant Activity of Adiantum lunulatum // Journal of Herbal Medicine and Toxicology. — 2009. — № 3(2). — P. 39—44.