При этом одним из ключевых вопросов, возникающих при разработке нормативной документации, является вопрос о выборе группы биологически активных веществ (БАВ) для разработки методик определения подлинности и качества сырья. Существующий на сегодняшний день подход к стандартизации предполагает ее проведение как по группам БАВ, которые извлекает экстрагент, рекомендуемый для получения лекарственных форм, так и по группам БАВ, определяющих фармакологическое действие [1].
Для выполнения поставленной задачи исследования нами были изучены электронные спектры извлечений из травы хвоща лесного, полученные различными экстрагентами (вода, водно-спиртовые смеси различной концентрации). При этом нами было принято во внимание то обстоятельство, что фенольные соединения в траве хвоща лесного представлены не только фенолокислотами, но и значительно более разнообразным составом гликозидированных флавоноидов, что требует более тщательного подбора условий экстрагирования [2; 6].
Анализ электронного спектра водного извлечения не выявил значимых для диагностики экстремумов. Водно-спиртовые извлечения, полученные с использованием в качестве экстрагента 40 % и 70 % этанола имеют общий максимум поглощения при 321 ± 4 нм, обусловленный присутствием фенолокислот. В спектрах 40 %, 70 % и 95 % водно-спиртовых извлечений присутствует маловыраженный максимум в области 269 — 272 нм, более характерный для флавоноидов. Кроме того, в видимой области спектров 70 % и 95 % водно-спиртового извлечения присутствовал выраженный максимум поглощения в области 663 ± 3 нм, характерный для хлорофилла α; а в видимой области спектра 95 % водно-спиртового извлечения дополнительно определены максимумы поглощения при 414 нм, 435 нм и 467 нм, также обусловленные присутствием хлорофилла α.
Сравнение спектральных характеристик известных веществ феруловой и кофейной кислот со спектрами 40 % и 70 % водно-спиртовых извлечений показало, что основной максимум поглощения в диапазоне волн ультрафиолетовой (УФ) — области спектра 321—323 нм близок основному максимуму поглощения кофейной кислоты. На рисунке 1 представлены электронные спектры поглощения известного вещества кофейной кислоты и 40 % водно-спиртового извлечения из травы хвоща лесного. Следует отметить, что кофейная и феруловая кислота, обнаруженные и выделенные нами в результате детального исследования химического состава хвоща лесного, являются доминирующими среди прочих представителей этого класса соединений. Это позволяет предложить определение фенолокислот в качестве одного из показателей качества данного сырья, наравне с флавоноидами.
Таким образом, на основании предварительного изучения электронных спектров водных, водно-этанольных извлечений нами было сделано заключение о возможности использования фенолокислот для оценки качества травы хвоща лесного и введения проект фармакопейной статьи (ФС) такого показателя как содержание фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту.
Рисунок 1. Электронные спектры водно-спиртового извлечения хвоща лесного, полученного 40 % этиловым спиртом (1) и кофейной кислоты (2)
Для реализации этой задачи нами был использован объективный, современный, общепринятый метод количественного определения суммы фенолокислот в исследуемом сырье — метод прямой спектрофотометрии [3; 4; 7]. При этом нами были отработаны и установлены оптимальные параметры экстракции, к которым относятся измельченность; вид экстрагента и его концентрация, температура при которой происходит экстрагирование фенолокислот, продолжительность процесса экстрагирования и кратность экстракций.
Проведенная нами валидационная оценка [5; 8] разработанной методики показывают, что предлагаемая методика количественного определения фенолокислот в траве хвоща лесного методом прямой спектрофотометрии является высокочувствительной, правильной, воспроизводимой и линейной. В настоящее время нами рассматривается возможность ее использования для проведения сквозной стандартизации «лекарственное сырье — жидкий экстракт — таблетки». А для стандартизации травы хвоща лесного в проект фармакопейной статьи (ФС) нами введен показатель «содержание фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту, не менее 0,1 %».
список литературы:
1.Баландина И.А. Совершенствование принципов и методов фармакопейного анализа в системе стандартизации лекарственного растительного сырья и лекарственных средств на его основе: автореф. дис. … д-ра фарм. наук. — Москва, 2004. — 38 с.
2.Бондарчук Р.А., Коломиец Н.Э. Исследование фенольных соединений хвоща лесного EquisetumsylvaticumL. // Бюллетень сибирской медицины. — 2011. — № 5. — С. 25—29.
3.Браславский В.Б., Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Безрукова Н.А. Количественное определение суммы флавоноидов и гидроксикоричных кислот в почках некоторых видов PopulusL. // Растительные ресурсы. — 1991. — Вып. 3. — С. 130—134.
4.Государственная фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР.-11-е изд., доп. — М: Медицина, 1989. — 400 с.
5.ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений. М.: ИПК Издательство стандартов, 2002. — 42 с.
6.Коломиец Н.Э. Фармакогностическое исследование рода EquisetumL. флоры Сибири как источника лекарственных средств: автореф. дис. докт. фарм. наук. — Москва, 2010. — 43 с.
7.Крупникова Т.А., Драник Л.И., Давыдова В.Н. Количественное определение оксикоричных кислот в листьях кукурузы // Растительные ресурсы. — 1971. — вып. 3. — С. 449—452.
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
8.Руководство ICH Валидация аналитических методик. Содержание и методология» Q2(R1); Официальные документы // Фармация, 2008. — № 4. — С. 7—10.