Показано, что применение тиоктовой кислоты позволяет значительно снизить проявления ишемического симптомокомплекса и выраженность свободно-радикальных процессов, что свидетельствует об эффективности данного препарата в лечении экспериментального острого панкреатита.
ABSTRACT
Background — substantiate the efficiency of application of thioctic acid in experimental acute pancreatitis. The efficiency of application of thioctic acid porpoises is determined by studying the dynamics of levels of lactic acid and malondialdehyde in blood serum, tissues of the pancreas and liver. Application of thioctic acid considerably lowers the display of ischemic lesion and expressiveness of free-radical processes that testifies to the efficiency of the given preparation in treatment of an experimental acute pancreatitis.
Ключевые слова: острый панкреатит; тиоктовая кислота; ишемия; липопероксидация.
Keywords: acute pancreatitis; thioctic acid; ischemia; lipoperoxidation.
В настоящий момент наблюдается неуклонный рост заболеваемости острым панкреатитом среди лиц работоспособного населения, что ставит данную проблему значимой не только с медицинской точки зрения, но и социально-экономической [2, с. 35]. Для лечения острого панкреатита (ОП) предложено большое количество методов, но ни один из существующих способов не оказывает достоверного эффективного влияния на течение и исход заболевания [1, с. 67]. Согласно современным представлениям, ведущие и взаимосвязанные звенья в патогенезе острого панкреатита занимают прогрессирующие микроциркуляторные нарушения с ишемическим симптомокомплексом и активация свободно-радикальных процессов [3, с. 43]. Низкая исходная антиоксидантная защита поджелудочной железы и ее угнетение при ОП диктуют необходимость применения антиоксидантных препаратов [6, с. 78].
Одним из мощных антиоксидантов является тиоктовая кислота (ТК), имеющая широкий спектр биологического действия. Это обусловлено ее участием в процессах окислительного декарбоксилирования, облегчая превращение молочной кислоты в пировиноградную с последующим декарбоксилированием последней и купированием метаболического ацидоза (Дж. Бустаманте с соавт., 2001). Многочисленные исследования показали высокую эффективность ТК при лечении диабетической полинейропатии, энцефалопатии, синдрома диабетической стопы, в токсикологии и гепатологии. Имеются единичные исследования по применению ТК при остром экспериментальном панкреатите. Комплексные исследования по обоснованию применения тиоктовой кислоты при остром панкреатите отсутствуют.
Целью исследования являлось определение эффективности применения тиоктовой кислоты в условиях экспериментального острого панкреатита (ЭОП) путём изучения в динамике уровня молочной кислоты (лактата) и одного из вторичных продуктов — малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови, тканях поджелудочной железы (ПЖ) и печени.
Исследование проведено на 95 морских свинках обоего пола массой 600—800 г. Выбор в качестве экспериментальных животных морских свинок обусловлен тем, что они, как и человек, неспособны к эндогенному синтезу аскорбиновой кислоты — одного из ключевых антиоксидантов. Моделировали экспериментальный ОП у 90 особей: в асептических условиях под эфирным наркозом производили верхнесрединную лапаротомию и выделяли ПЖ. В протоковую систему железы вводили 0,5—1,0 мл стерильной гетерожелчи с каплей аутокрови с механическим повреждением ее ткани браншами пинцета. В брюшную полость экспериментального животного для дальнейшего введения препарата ставили эпидуральный катетер.
Животные были разделены на 4 группы. В первую группу вошли 30 животных с ЭОП без применения каких-либо лекарственных веществ. Вторая группа — 30 животных, которым через 2 часа от начала эксперимента и затем ежедневно вводили интраперитонеально 0,9 % раствор NaCl в разовой дозе 6 мл/кг. Третьей группе из 30 животных через 2 часа от начала эксперимента и далее ежесуточно вводили ТК интраперитонеально в разовой дозе 10 мг/кг. Срок наблюдения животных составлял 5 суток. Изучение полученного материала (пробы крови, биоптаты ПЖ и печени) осуществляли через 24, 72 и 120 часов от начала эксперимента. Животные выводились из опыта путем ингаляции летальной дозы эфира и декапитации по 10 особей в каждой группе. 4 группу составили 5 интактных морских свинок, у которых получены нормальные биохимические показатели путём забоя в аналогичных условиях.
Биоптаты отмывали холодным (+4˚С) 0,9 % раствором NaCl и замораживали в жидком азоте, пробы крови центрифугировали с замораживанием полученной сыворотки. Хранение вышеназванных материалов производили в морозильной камере при температуре –18 ˚С.
Определение концентрации МДА проводили набором реактивов для определения ТБК-активных продуктов «ТБК–АГАТ», лактата — энзиматическим колориметрическим методом с использованием стандартного набора реагентов Ольвекс Диагностикум (Kat. No: 019.002).
Результаты и обсуждение. В таблице 1 приведены результаты изучения динамики МДА и лактата в сыворотке крови, в таблице 2 — в ткани ПЖ, в таблице 3 — в ткани печени у обследованных групп животных.
Изучение уровня МДА в сыворотке крови I группы показало превышение нормы через 24 часа в 1,52 раза (р>0,05), через 72 часа — в 1,92 раз (р<0,01), через 120 часов — в 5,86 раз (р<0,01). Сходная картина выявлена в динамике концентрации лактата: она увеличивается соответственно в 2,82, 3,79, 5,94 раз (р<0,01). В тканях ПЖ и печени животных I группы динамика изучаемых показателей аналогична: прогрессирующее нарастание МДА в ПЖ в 3,4 раза (р<0,01), в печени — более, чем в 7 раз (р<0,01). Уровень лактата в ПЖ увеличивается почти в 3 раза (р<0,01), а в печени — более, чем в 3 раза.
Таблица 1.
Динамика уровня лактата и МДА в сыворотке крови
Жирный шрифт — разница достоверна по сравнению с нормой;
* — разница достоверна по сравнению с соответствующим показателем в группе без лечения;
** — разница достоверна по сравнению с соответствующими показателями в обеих предыдущих группах
Анализ результатов, полученных в данной группе животных, подтверждает факт выраженной ишемизации панкреатической ткани и печени при ОП, что сопровождается прогрессирующим повышением уровня лактата в сыворотке крови и ткани печени достоверно на всех сроках, а в ткани ПЖ на 3 и 5 сутки. Ишемия ткани ПЖ сопровождается активацией ПОЛ в виде прогрессирующего повышения МДА на всех сроках наблюдения.
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
Изучение вышеназванных показателей во II группе показало идентичную картину. В сыворотке крови уровень МДА увеличился соответственно в 1,65—3,63 раза (р<0,01 через 72 и 120 часов), лактата — в 2,12-7,72 раза (р<0,02 на всех сроках).
Содержание изучаемых метаболитов в тканях ПЖ и печени у животных II группы аналогично по динамике. Обращает на себя внимание практически отсутствующая достоверная разница соответствующих показателей в I и II группах. Применение физиологического раствора NaCl не меняет существенно течения ОП у экспериментальных животных. Сохраняются нарастающие явления анаэробного гликолиза и активация ПОЛ в сыворотке крови, тканях ПЖ и печени.
Таблица 2.
Динамика лактата и МДА в ткани ПЖ
Жирный шрифт — разница достоверна по сравнению с нормой;
* — разница достоверна по сравнению с соответствующим показателем в группе без лечения;
** — разница достоверна по сравнению с соответствующими показателями в обеих предыдущих группах
При введении ТК также имеет место значительная активация липопероксидации, но она в общем менее выражена, особенно к 5 суткам, когда уровень МДА становится в 1,5—3 раза ниже соответствующих показателей в I и II группах (р<0,05, р<0,01). Повышение содержания лактата выражено менее значительно. В сыворотке крови его уровень достоверно выше нормы, однако к 5 суткам он почти в 2 раза ниже, чем в других группах (р<0,02). В ткани ПЖ содержание лактата повышается (через 24 и 120 часов недостоверно) по отношению к норме, являясь более низким (достоверно через 120 часов), чем в других группах. В печени содержание лактата достоверно выше нормы во все дни наблюдения, но его уровень значительно ниже соответствующих значений в I и II группах, с двукратной разницей через 120 часов (р<0,01).
Таблица 3.
Динамика изучаемых показателей в ткани печени
Жирный шрифт — разница достоверна по сравнению с нормой (р<0,05, р<0,01, р<0,001);
* — разница достоверна по сравнению с соответствующим показателем в группе без лечения;
** — разница достоверна по сравнению с соответствующими показателями в обеих предыдущих группах;
Динамика изучаемых показателей в сыворотке крови и исследуемых тканях практически идентична, что подтверждает закономерность изучаемых процессов.
Таким образом, экспериментальный ОП у морских свинок характеризуется выраженной активацией анаэробного гликолиза, что отражает прогрессирующую ишемию панкреатической ткани. Нарастает содержание продуктов липопероксидации, свидетельствующее об активации процессов ПОЛ. Применение 0,9 % раствора NaCl не приводит к значимым изменениям динамики изучаемых показателей. Введение ТК снижает выраженность ишемических процессов, уменьшаются проявления свободно-радикального окисления.
Выводы.
1. Экспериментальный острый панкреатит у морских свинок характеризуется нарастающим ишемическим поражением панкреатической ткани с активацией свободно-радикальных процессов.
2. Применение тиоктовой кислоты позволяет снизить проявления ишемического поражения ткани поджелудочной железы и выраженность свободнорадикальных процессов при экспериментальном остром панкреатите, что говорит об эффективности данного метода лечения и открывает перспективу для дальнейших исследований.
Список литературы:
1.Брискин Б.С., Рыбаков Г.С. Хирургическое лечение острого панкреатита // Рос. журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — 2000. — № 2. — С. 67—74.
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
2.Вашетко Р.В. с соавт. Острый панкреатит и травмы поджелудочной железы. СПб., 2000. — 320 с.
3.Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН, — 1998. — № 7. — С. 43—51.
4.Ярема И.В., Колобов С.В., Шевченко В.П. Аутоиммунный панкреатит. М., 2003. — 208 с.
5.Roth E., Manhart N., Wessner B. Assessing the antioxidative status in critically ill patients. //Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. — 2004. — Vol. 7 (2). — P. 161—168.
6.Simovic M.O., Bonham M.J., Abu-Zidan F.M., Windsor J.A. Manganese superoxide dismutase: a marker of ischemia-pereperfusion in injury in acute pancreatitis ? // Pancreas. — 1997. — V. 15 (1). — P. 78—82.
7.Sweiry J.H., Mann G.E. Role of oxidative stress in the pathogenesis of acute pancreatitis // Scand. J. Gastroenterol. — 1996. — № 219. — P. 10—15.