Такое лечение проводится пожизненно и требует постоянного контроля, чтобы не допустить хронической передозировки тиреоидных гормонов, которая имеет тяжелые последствия (нарушается работа сердечно-сосудистой системы, снижается абсорбция кальция в кишечнике, развивается остеопороз [1, 3]. В связи с этим, не теряет актуальности поиск альтернативных путей коррекции гипотиреоидного состояния.
Учитывая механизмы патогенеза гипотиреоза, вещество, способное влиять на состояние щитовидной железы и организма в целом, должно обладать свойствами иммуномодулятора, антиоксиданта, гепатопротектора. Такие свойства имеет синтетический аналог лейэнкефалина даларгин [5, 6], что дает основание апробировать его в качестве корректора тиреоидного и антиоксидантного статуса организма при гипотиреозе.
Цель проведенного исследования заключалась в выявлении изменений уровня тиреоидных гормонов, активности липопероксидации и массы тела, щитовидной железы, печени, селезенки при экспериментальном гипотиреозе.
Материалы и методы исследования. Опыты проведены на 38 беспородных белых крысах-самцах массой 170—200 г в осеннее-зимний период. Исследования проводились согласно правилам лабораторной практики в РФ (ГОСТ З 51000.3-96 и 51000.4-96). Содержание животных, питание, уход соответствовали ГОСТ Р 5025892.
Животные были разделены на 3 группы: 1 — контрольная (10 интактных крыс), 2—14 крыс с гипотиреозом (введение мерказолила с кормом, 10 мг/кг в сутки, 8 недель [4, 8], 3—14 крыс с гипотиреозом, получавших даларгин (в/м, 0,1 мг/кг, ежедневно, 10 суток после окончания моделирования гипотиреоза). Через 2, 7 и 28 суток после окончания моделирования гипотиреоза животных взвешивали и усыпляли эфиром (на каждый срок 8 крыс). Для исследования брали кровь, щитовидную железу, печень.
Концентрацию свободного Т4(пМ/л) и общего Т3 (нМ/л) определяли в сыворотке крови иммуноферментным методом (на системе ИФА).
Активность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивали по концентрации в сыворотке крови и гомогенате печени диеновых конъюгатов (ДК, мМ/мл на 1 г ткани, методом В.В Гаврилова и М.И. Мишкорудной [2]) и малонового диальдегида (МДА, мМ/мл на 1 г ткани, методом И.Д. Стальной, Т.Г. Гаришвили [7]).
Результаты исследования обработаны c помощью статистического пакета программ Statisticav.6. Определяли тип распределения и оценивали выявленные различия с помощью t-критерия Стьюдента (различия считались статистически значимыми при p<0,05).
Результаты исследования. После отмены мерказолила у животных формировался гипотиреоз, который характеризовался устойчивым увеличением массы тела в 1,3—1,5 раза и снижением уровня тиреоидных гормонов в крови (табл. 1). На 2 сутки наблюдения концентрация в крови Т3 была снижена в 5 раз, Т4 в 6,5 раза, а на 28 сутки — в 2,6 и 7 раз, соответственно.Масса щитовидной железы при этом была увеличена на 2 сутки в 5,5 раз, на 7 сутки в 2,8 раза, на 28 сутки в 3,7 раза. Масса печени тоже возрастала во все сроки наблюдения в 1,4—1,8 раза. Процессы ПОЛ в организме активировались. На это указывает увеличение суммарного количества продуктов ПОЛ за счет накопления ДК в крови и печени на протяжении всего наблюдения (табл. 1).
При введении даларгина животным с гипотиреозом (десятидневный курс) уже на 2-е сутки после начала инъекций уровень в крови Т3 увеличился в 4,6 раза, а Т4 свободного в 6,6 раза и стабилизировался на уровне значений у интактных животных (табл. 1). При этом масса щитовидной железы уменьшилась на 2 сутки в 2,4 раза, а к 28 суткам нормализовалась. Механизмы этого эффекта даларгина требуют отдельного глубокого исследования структуры и функций щитовидной железы и, предположительно, могут быть связаны с его антигипоксическим, антиоксидантным и иммуномодулирующим действием.
Несмотря на повышение уровня гормонов, масса тела у животных с гипотиреозом, получавших даларгин, не уменьшалась до конца наблюдения, но в период инъекций даларгина нормализовалась масса печени, в ней снижалась активность процессов липопероксидации (содержание ДК в печени снизилось в 1,5 раза) и активировалась элиминация их продуктов в кровь (уровень ДК в крови на 7 сутки превысил нормальное значение в 2,5 раза, табл. 1). После прекращения инъекций даларгина масса печени вновь увеличивалась, а процессы ПОЛ активировались. Эти данные подтверждают антиоксидантные свойства даларгина.
Таблица 1.
Тиреоидный статус, активность ПОЛ, масса тела и органов у животных с гипотиреозом, получавших и не получавших даларгин
Примечание: 1 — отличие от интактных животных при р<0,05 (n=8);
2 — отличие от животных с гипотиреозом, не получавших даларгин, при р<0,05 (n=8)
Таким образом, выявлены долгосрочные и кратковременные корригирующие эффекты даларгина при экспериментальном гипотиреозе, вызванном мерказолилом. К долгосрочному эффекту можно отнести увеличение продукции тиреоидных гормонов, сохраняющееся в течение 1 месяца. Кратковременные эффекты наблюдались лишь в период инъекций даларгина и проявлялись ослаблением в печени процессов липопероксидации и активацией элиминации их продуктов в кровь, а также уменьшением массы печени до нормы.
Список литературы:
Будневский А.В., Грекова Т.И., Бурлачук В.Т. Гипотиреоз и нетиреоидные заболевания. Петрозаводск: ИнтелТек, 2004. — 169 с.
Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания диеновых коньюгатов в крови // Лаб. Дело — 1983. — № 3. — С. 33—36.
Калинин А.П., Лукьянчиков В.С., Нгуень Кхань Вьет. Современные аспекты тиреотоксикоза (лекция) // Проблемы эндокринологии. — 2000. — № 4. — С. 101—103.
Козлов В.Н. Тиреоидная трансформация при моделировании эндемического эффекта у белых крыс в эксперименте // Сибирский медицинский журнал. — 2006. — № 5. — С. 27—0.
Николаев А.В. Даларгин и его использование для анальгезии в онкологии // Актуальные вопросы интенсивной терапии. — 2003. — № 12. — С. 29.
Николаев А.В., Слепушкин В.Д. Отечественный препарат даларгин и его использование в онкологии // Справочно-информ. Издание «Будьте здоровы». Новосибирск. — 1999. — С. 14—16.
Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового альдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы биохимии: под ред. Ореховича. М.: Медицина,1977. — С. 66—68.
Chehade J., Kim J., Mooradian A.D. Malondialdehyde binding of rat cerebral proteins is reduced in experimental hypothyroidism // Brain Reasearch. — 1999 — № 5. — Р. 201—203.