Известно, что развитие резистентности напрямую зависит от длительности введения антибиотика [5], поэтому для профилактики формирования резистентности в настоящее время врачи используют антибиотикопрофилактику [4], для чего противомикробный препарат назначают заранее — за 1 час до какого-либо вмешательства, в разовых дозах, возможно несколько раз, но в течение одних суток [6]. Таким образом, антибиотик назначается пациентам без прямых показаний для профилактики осложнений, которые могут и не возникнуть. Влияние антибиотикопрофилактики на микрофлору до сих пор дискутируются, фундаментальные научные данные скудны, у практических врачей нет единого мнения о ее безопасности и эффективности [7]. Лимфотропный способ введения лекарств имеет ряд преимуществ перед классическими методами и в первую очередь более длительное и в большей концентрации сохранение препарата в лимфатическом близлежащем регионе относительно места инъекции [3]. Особенно все эти преимущества усиливаются при региональном лимфотропном способе введения лекарств. Но при данном способе терапии практически нет данных о состоянии микробной резистентности различных биоценозов в эксперименте, относительно их регионального расположения.
Цель работы. Изучить зависимость изменений резистентности микрофлоры различных биоценозов крысы от локализации лимфатического региона, длительности и места инъекции при лимфотропном введении цефтриаксона, сделать сравнительный анализ полученных результатов.
Материал и методы.
Объектом исследования были крысы-самцы линии Вистар, массой 100—120 г. Животные были разделены на 2 серии по 5 групп, в каждой группе — 6 животных. Номер группы в серии соответствовал продолжительности курса введения антибиотика, а номер серии зависел от места инъекции при лимфотропном способе введения препарата. В I серии препарат вводили в подушечку передней стопы слева, где биоценоз перианальной области является отдалённым, а остальные расположены в лимфатическом регионе относительно места инъекции. Во II серии лимфотропная инъекция располагалась на задней стопе слева, следовательно, распределение биоценозов противоположное.
В начале эксперимента у всех животных брались мазки из следующих биоценозов: перианальной, ротовой областей, левого и правого наружных слуховых проходов для определения исходной резистентности микрофлоры к цефтриаксону. Это осуществлялось следующим образом: шпатель после мазка опускали в пробирку с 5 мл мясопептонного бульона на 1 ч при комнатной температуре, далее в неё добавляли цефтриаксон из расчёта 50 мг/л для определения исходной резистентности, затем все пробирки от каждого животного помещали на 1 сут в термостат при температуре 35,5 0С. Далее животным I серии вводили цефтриаксон в дозе 50 мг/кг/сут лимфотропно в переднюю стопу, животным II серии препарат вводили лимфотропно в заднюю стопу [3]. Цефтриаксон удобен для эксперимента, т. к. его можно вводить 1 раз в сутки, данная концентрация является максимально допустимой, выводится с мочой и жёлчью, кишечная палочка разрушает его в неактивные, но достаточно токсичные метаболиты.
На следующий день определяли оптическую плотность среды в пробирках относительно стерильного мясопептонного бульона в кюветах толщиной 3,3 мм, длиной волны 45 нм, при этих параметрах полученные показатели имели наименьшие отклонения. По степени изменения оптической плотности культивируемых жидких сред косвенно определяли концентрацию микробных тел исследуемых биоценозов, которые могут размножаться в мясопептонном бульоне. Данный способ удобен своей простотой, скоростью и дешевизной, нами обнаружена прямая пропорциональная зависимость между двумя этими показателями. В первой группе каждой серии делали мазки из указанных биоценозов, этих животных выводили из эксперимента на 1 нед. В оставшихся группах продолжали вводить антибиотик соответственно серии в той же дозе.
Регенеративную способность микрофлоры invitro рассчитывали путём вычитания из большего показателя меньшего.
На следующий день эти действия повторяли во второй группе обеих серий, и так далее пять дней, т. е. во всех сериях и группах.
Математический и статистический анализы полученных данных производили с использованием аналитической программы Statistica 6.0.
Результаты и обсуждение.
Полученные результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Регенеративная способность микрофлоры биоценозов белых крыс на фоне лимфотропного введения цефтриаксона в дозе 50 мг/кг/сутки (М ±m, n-6)
I— лимфотропное введение цефтриаксона в подушечку передней стопы
II— лимфотропное введение цефтриаксона в подушечку задней стопы
* — различия достоверны (p<0,05) относительно исходных данных
# — различия достоверны (p<0,05) в серии относительно предыдущего срока
ν — различия достоверны (p<0,05) в группе между сериями
Исходные данные регенеративной способностимикроорганизмов биоценозов определили во всех исследуемых биоценозах пяти групп животных и двух серий. Самые высокие показатели обнаружили в биоценозах перианальной области и ротовой полости, ведь здесь находится самая многочисленная, разнообразная и вирулентная микрофлора.
Через 1 сутки после первой лимфотропной инъекции антибиотика во всех региональных биоценозах регенеративные свойства микрофлоры значимо увеличились (p<0,05), это скорей связано с изменением состава микрофлоры. Происходит резкое угнетение той части микрофлоры, которая чувствительная к действию данного препарата. Нечувствительная и малочувствительная части при уменьшении конкуренции обладают максимальными регенеративными свойствами. В отдалённых биоценозах состояние микрофлоры недостоверно изменялось относительно исходного уровня.
Нужна помощь в написании статьи?
Мы - биржа профессиональных авторов (преподавателей и доцентов вузов). Пишем статьи РИНЦ, ВАК, Scopus. Помогаем в публикации. Правки вносим бесплатно.
В последующие дни эксперимента регенеративная способность постепенно уменьшается за счёт нарастания концентрации цефтриаксона во всех тканях микроорганизма.
На 5-ые сут. способность размножения микроорганизмов максимально угнетается т.к. начинает действовать токсическое свойство антибиотика на всю микрофлору все биоценозов.
Заключение.
Регенеративная способность микрофлоры белых крыс на фоне различного регионального лимфотропного введения цефтриаксона в максимальной дозе 50 мг/кг/сутки зависит от длительности курса антибиотикотерапии и от регионального расположения изучаемых биоценозов. При лимфотропном методе введения в отдалённых регионах во всех сроках эксперимента изменения достоверно незначимы. Только в близлежащем лимфатическом регионе регенеративная способность микрофлоры достоверно значимо увеличивается и нормализуется к исходным значениям на вторыесут. При наличии патологического процесса в одном лимфатическом регионе локальные точки лимфотропного введения лекарств намного предпочтительней.
Список литературы:
Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов. — М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2004. — С. 55—71.
Белобородов В.Б. Резистентные грамположительные микроорганизмы: современные возможности и перспективы терапии.Бактериальные инфекции // Consilium Medicum Том 06/N 1/2004
Левин Ю.М; Эндоэкологическая медицина и эпицентральная терапия. Новые принципы и методы. М.: Щербинская типография, 2000. — 344 с.
Сидоренко С.В. Антибактериальная терапия: кризис жанра или свет в конце тоннеля? // РМЖ. — Т. 11, № 18(190), 2003. — С. 997—1001.
Страчунский Л.С., Белоусов Ю.Б., Козлов С.Н. // Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. — М., 2002. — С. 393—397.
Эпидемиология антибиотикорезистентности нозокоминальных штаммов Staphylococcusaureusв России: результаты многоцентрового исследования / Дехнич А.В., Эйдельштейн И.А., Нарезкина А.Д. и др. // Клиническая микробиология антимикробная химиотерапия. — 2002. — Т. 4, № 4. — С. 325—336.
Stratchounski L.S., Kozlov R.S., Appelbaum P.C., Kretchikova O.I., Kosowska-Shick K. Antimicrobial resistance of nasopharyngeal pneumococci from children from day—care centres and orphanages in Russia: results of a unique prospective multicentre study. Clin Microbiol Infect 2006; 12: 853—866.